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解決方案——食品中維生素C的測(cè)定

更新時(shí)間:2022-04-07      點(diǎn)擊次數(shù):2267

 

解決方案——食品中維生素C的測(cè)定

抗壞血酸,是一種多羥基化合物,化學(xué)式為C6H8O6,具有2個(gè)手性碳原子,分為L(zhǎng)-抗壞血酸和D-抗壞血酸。L-抗壞血酸為左式右旋光抗壞血酸,具有強(qiáng)還原性,對(duì)人體具有生物活性;D-抗壞血酸又稱(chēng)異抗壞血酸,具有強(qiáng)還原性,但對(duì)人體無(wú)生物活性。

L-抗壞血酸,常稱(chēng)維生素C,廣泛存在于新鮮的蔬菜水果中,如西紅柿、菜花、柿子椒、深色葉菜、苦瓜,柑橘、柚子、蘋(píng)果、葡萄、獼猴桃、鮮棗等;人工合成維生素常添加于功能飲料、功能性保健食品中,作抗氧化作用,清除自由基、促進(jìn)抗體形成及參與人體內(nèi)許多重要的生物合成反應(yīng)。

D-抗壞血酸是以葡萄糖等為原料,經(jīng)發(fā)酵制得的2-酮基-D-萄糖酸,再經(jīng)酯化、酸化、精制等步驟生產(chǎn)的食品添加劑,一般作護(hù)色劑和防腐劑,常用于肉類(lèi)制品、魚(yú)肉制品、水果罐頭等食品加工中,防止細(xì)菌生長(zhǎng)、與亞硝酸鹽硝酸鹽合用提高肉類(lèi)制品的發(fā)色效果。

《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中抗壞血酸的測(cè)定GB 5009.86-2016 》規(guī)定了L-抗壞血酸和D-抗壞血酸的測(cè)定,但不同構(gòu)型的抗壞血酸在食品中作用差異巨大,因此,考察L-抗壞血酸和D-抗壞血酸的分離度、方法穩(wěn)定性和結(jié)果重現(xiàn)性至關(guān)重要。

抗壞血酸屬于大極性化合物,在C18柱上保留弱、出峰時(shí)間過(guò)早,容易與溶劑峰發(fā)生重疊,影響抗壞血酸的定性和定量。但我們可以從兩方面來(lái)增強(qiáng)抗壞血酸在色譜柱上的保留,避免溶劑峰干擾:一點(diǎn)、流動(dòng)相中加入離子對(duì)試劑,延長(zhǎng)抗壞血酸的保留時(shí)間;二、使用混合模式的色譜柱Acclaim Mixed-Mode WAX-1,擁有疏水性烷基鏈和可電離的叔胺末端,提供疏水性反相保留和弱陰離子交換,大大提高了極性化合物在色譜柱上的保留能力。

解決方案

加入離子對(duì)試劑

使用混合模式色譜柱

色譜柱

普通C18色譜柱

Acclaim Mixed-Mode WAX-1

流動(dòng)相

A: 6.8g磷酸二氫鉀和0.91g十六烷基三甲基溴化銨,用水溶解,磷酸調(diào)節(jié)pH至2.5~2.8,定容至1L, B:甲醇; A: B=98:2

A: 25mM磷酸氫二銨(磷酸調(diào)pH至6.0), B:乙腈; A: B=98:2

流速

0.7mL/min

0.8mL/min

波長(zhǎng)

245nm

245nm

優(yōu)缺點(diǎn)

離子對(duì)試劑——十六烷基三甲基溴化銨使抗壞血酸得到保留,但方法不穩(wěn)定,連續(xù)進(jìn)樣保留時(shí)間會(huì)往后漂移,且L-抗壞血酸和D-抗壞血酸分離度也會(huì)變差。

未使用離子對(duì)試劑,流動(dòng)相為常規(guī)試劑,不會(huì)對(duì)色譜柱造成不可逆的損傷;方法穩(wěn)定,重現(xiàn)性好。

推薦指數(shù)

★★★

★★★★★



Acclaim Mixed-Mode WAX-1測(cè)試維生素
C譜圖

 

 

L-抗壞血酸和D-抗壞血酸連續(xù)6針進(jìn)樣,保留時(shí)間RSD均小于0.5%,響應(yīng)值RSD均小于1.0%。


色譜柱信息

名稱(chēng)

Thermo Scientific™  Acclaim Mixed-Mode WAX-1

規(guī)格

5 μm, 4.6×250 mm

貨號(hào)

064985

 

參考文獻(xiàn):

Thermo Scientific™ application, Acclaim Mixed-Mode WAX-1 應(yīng)用于食品中L-抗壞血酸和 D-異抗壞血酸的測(cè)定

 

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